• Příprava bakteriální pasty nebo lyzátu z buněčných sedimentů

Buňky jsou rozrušeny mechanicky (sonikace, French Press)  nebo pomocí detergentu a následně jsou centrifugovány. Rozpustné a nerozpustné proteinové frakce jsou oddeleny a analyzovány na přítomnost proteinu.

• Izolace inkluzních tělísek z E.coli a extrakce proteinů z nerozpustných frakcí

Bakteriální sediment je promyt a inkluzní tělíska jsou extrahovány močovinou, guanidium chloridem nebo detergenty. Nabízíme různé extrakční alternativy pro různé cílové proteiny.

• Proteinový refolding

Testujeme různé podmínky refoldingu (převedení proteinu do nativního stavu).

• Chromatografie

Naše standardní chromatografické postupy zahrnují gelovou filtraci, iontově-výměnnou chromatografii, afinitu k purifikačním značkám, imunosorbenty nebo sorbenty s hydrofobní interakcí. V případě potřeby může být použita také afinita k barevným částicím, nukleotidům, hydroxyapatitu a jiné chromatografické postupy. Purifikační kroky jsou monitorovány pomocí absorbance při 280 nm. Jednotlivé frakce purifikačního procesu jsou analyzovány metodami SDS-PAGE nebo v případě potřeby mohou být použity jiné testy.

• Odstranění endotoxinu

Endotoxin je z proteinových preparátů odstraněn pomocí isopropanolu, cyklodextrínu nebo detoxygelu.