Prokaryotická exprese

• Test exprese ve vybraném bakteriálním kmeni E. coli zahrnuje optimalizaci kombinace insert / vektor / hostitel, přípravu fragmentu a vektoru, ligaci, transformaci, následnou izolaci,sekvenaci a uchovávaní DNA správných klonů. Sekvenací ověřená DNA je transformována do hostitelských buňěk a exprese proteinu je analyzována pomocí SDS-PAGE nebo Western blotu.
• Vliv média, teploty a indukčních podmínek na expresi proteinu je určen experientálně pro jednotlivé proteiny. Míru exprese a distribuci proteinu mezi rozpustnou a nerozpustnou buněčnou frakci analyzujeme pomocí SDS-PAGE nebo Western blotu.

Eukaryotická exprese

• Transientní exprese v savčích buňkách

  Transientní exprese v savčích buňkách zahrnuje transfekci Vámi dodaného nebo námi připraveného expresního vektoru do vhodné buněčné linie a selekci pomocí antibiotické nebo jiné rezistence. Buněčný růst a životnost jsou monitorovány a exprese proteinu je analyzována pomocí metod SDS-PAGE/Western blot/dot blot.
   

• Stabilní exprese v savčích buňkách

  Stabilní exprese v savčích buňkách zahrnuje kultivaci buněk, monitorování růstu a životnosti buněk. Exprese proteinu je identifikována pomocí metod SDS-PAGE/Western blot/dot-blot.